物理形态: 质谱级Trypsin蛋白酶是冻干粉分子量: 23kDa.
溶解液(HLS HCL001C):Trypsin蛋白酶复溶解缓冲液建议1mM盐酸
储存条件:冻干粉末存储在-20℃冰箱,再溶解的酶储存在-20℃。有效期见产品标签
保质期:12月在-20℃
pH 值范围: pH7-9范围有最大的活性,在pH4翻转无活性
适用范围:Trypsin蛋白酶特异性水解变性后蛋白质K和R位,推荐和rLys-C混合使用。
推荐SOP:
通用溶液酶解法
Trypsin蛋白酶按照 25至100:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C恒温过夜13-16小时.
温馨提示:
1.为了保证最大活性,使用提供的胰蛋白酶溶解液溶解质谱级胰蛋白酶,使用前在30℃保温15分钟
2.尿素的浓度最好小于1M
纯度: 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度,Trypsin峰强度大于99.9%
专一性:HSA人血清白蛋白样品,ESI-MS/MS质谱分析K和R端的专一性大于99.8%
活性: 13397u/mg; 单位定义:胰蛋白酶同酶底物BAEE反应,在25℃需要产生每分钟在波长253nm, 每0.001吸收值的差的数量
Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用HCCA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰
LC-MS/MS 质谱分析: 使用Trypsin酶解HSA(人血清白蛋白,纯度99.9%)实验,DTT还原,lAA保护,PH8.0, 37°C恒温过夜16小时,液质Q-E联用仪分析,覆盖率86%