物理形态: 质谱级rGlu-C蛋白酶是冻干粉
分子量: 24kDa
溶解液:rGlu-C蛋白酶用超纯水溶解
储存条件:冻干粉末存储在-20℃冰箱,再溶解的酶储存在-20℃。有效期见产品标签
保质期:12月在-20℃
pH 范围: 在 4.0–9.0 时, Glu-C 具有最佳活性
适用范围:rGlu-c蛋白酶特异性水解变性后蛋白质D和E位
溶液酶解SOP:50ug rGlu-C 蛋白酶按照 25:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 在pH8.5下,37°C恒温过夜13-16小时
纯度: 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度,rGlu-C峰强度大于99.9%
活性: 800unit/min/mg;单位定义:rGlu-c白蛋酶每分钟酶切1.0 umole BOC-L-Glutamic Acid a phenyl Ester的量,反应条件:37℃,波长270nm
Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用HCCA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰
LC-MS/MS 质谱分析: 使用rGlu-c酶解HSA(人血清白蛋白,纯度99.9%)实验,DTT还原,IAA保护,PH8.0, 37°C恒温过夜16小时,液质Q-E联用仪分析,覆盖率80%
质谱级rGlu-C蛋白酶特异性水解在谷氨酸或天冬氨酸片段的C端的肽键。该酶适合在溶液中进行消化反应,不推荐用于胶内消化。在碳酸氢铵和醋酸铵缓冲液中,对谷氨酸残基的切割特异性更高;在磷酸盐缓冲液中,谷氨酸和天冬氨酸残基均可被切割。