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rPNGase F糖苷酶, 质谱级(货号:HLS PNG001C)

  • 产品说明书
  • 简要概述
    物理形态: 20mM Tris-HCl (pH 7.5 at 25°C), 50mM NaCl and 5mM EDTA溶液
     
    分子量: 35kDa
     
    浓度:10unit/ul
     
    储存条件:存储在4-10℃冰箱,禁止-20℃以下低温冷冻
     
    保质期:12月在4℃
     
    pH 范围: PH6.0–10.0 有活性, PH=8.6具有最佳活性
     
    适用范围:特异性酶切糖蛋白的N端寡糖
     
    溶液内酶解SOP:
    1.在 50mM 碳酸氢铵(pH 7.8)溶液中加入20ug变性的糖蛋白,调整体积至 18µl.
    2.加 2µl rPNGase F溶液
    3.37°C条件下, 保温 1–2 小时酶切糖蛋白样品
     
    纯度: 使用Maldi TOF检测杂质蛋白质峰强度,rPNGase F峰峰高比大于99.5%
     
    活性:   40000unit/min/mg;单位定义:rPNGase F蛋苷酶每分钟酶切1.0 umole 变性的Ribonuclease B的量,SDS-PAGE分析定量。反应条件:37℃,PH=7.5
     
    Maldi TOF质谱检测: 变性的RNase B 使用rPNGase F 糖苷酶在37°C酶切60min后,使用FA基质激光解析质谱分析,可见切糖后的重链蛋白 14.9kDa和轻链蛋白14.1kDa质谱峰,未见杂质蛋白信号,糖蛋白的糖切除完全。
     
    LC-MS/MS 质谱分析: 变性的RNase B经过PNGase F去糖处理,蛋白又使用Trypsin酶切成肽段,质谱鉴定到理论肽段9条,覆盖率67%。
     
 
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