物理形态: 质谱级rTrypsin-N蛋白酶是冻干粉,每瓶含有 0.47 mg HEPES; 0.05mg CaCL2
分子量: 29kDa
溶解液: 建议使用超纯水40ul溶解后使用, PH=7.5
储存条件:冻干粉末存储在-20℃冰箱,再溶解的酶储存在-20℃或-80℃。有效期见产品标签
保质期:24月在-80℃
pH 值范围: 在PH7.5 时, rTrypsin-N 具有最佳活性
适用范围:rTrypsin-N蛋白酶特异性水解变性后蛋白质K位和R位肽键
通用溶液酶解法:
1.蛋白酶推荐酶切体系:20-50mM HEPES或Tris 缓冲液
2.使用条件:按照 20:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C恒温反应4小时以上.温馨提示:
1.最大活性:建议蛋白样本经过变性和烷基化处理后,同时严格执行酶切反应体系和SOP
2.敏感性: 对1mM DTT, 0.1mM盐酸胍, 0.8M尿素,5%乙腈敏感,会降低酶切效率
纯度: 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度,rTrypsin-N峰强度大于99.0%专一性: 人血清白蛋白HSA样品,ESI-MS/MS质谱分析R/K端的专一性大于95.0%
活性: 140 unit/mg; 单位定义:r Trypsin N白蛋酶在366nm最大光密度值半数时,酶切叠氮酪蛋白的单位量,反应条件:37℃保温30min,PH=10
Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用FA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰
LC-MS/MS 质谱分析: 使用rTrypsin N酶解HSA(人血清白蛋白,纯度99.9%)实验,DTT还原,lAA保护, PH7.5, 37°C恒温酶切4小时,液质Q-E联用仪分析,覆盖率83%
质谱级rTrypsin-N蛋白酶特异性水解在赖氨酸K和精氨酸R片段的N端的肽键。新的酶切N端的系列蛋白酶。